- 张小其;孙云;周永灿;曹贞洁;
为了从蛋白水平和mRNA水平上比较和分析MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况,本研究构建了重组载体p ET32a(+)/M-Ⅱα和p ET32a(+)/M-Ⅱβ来诱导其表达,并制备了多克隆抗体,而且通过qRT-PCR技术分析了MHC Ⅱ类基因在卵形鲳鲹正常组织中的表达.结果显示,本研究成功表达了卵形鲳鲹MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因的融合蛋白,并制备出了效价高和特异性强的多克隆抗体;在利用Western Blot技术分析MHC Ⅱα或MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中对蛋白的表达情况时,均检测到一条大小约70k Da的疑似MHC Ⅱαβ二聚体的单一条带,且该MHC Ⅱαβ二聚体在脾脏、头肾、肠道、鳃中的表达量较高,而在胃、心、脑、肝中的表达量稍低.qRT-PCR的分析结果一致表明,MHC Ⅱ类基因广泛分布在不同组织中,尤其在与免疫相关的组织(脾脏、头肾、肠道、鳃)中,其具有较高表达量.
2018年02期 v.36;No.139 101-109页 [查看摘要][在线阅读][下载 1321K] [下载次数：196 ] |[引用频次：4 ] - 贡长慧;冯胜;沈文静;李军;
将动物生长抑素(SS)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合基因插入p ET28a系统,构建重组质粒pET28a-A4030-2-LTB并转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,获得了大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)p ET28a-A4030-2-LTB,然后使用SDS-PAGE检测该融合蛋白的表达并优化其发酵与包涵体洗涤条件,接着采用亲和层析法进行纯化,并用Western Blotting技术检测该融合蛋白的免疫原性.研究结果表明,在37℃,加入1 mmol/L的IPTG培养3 h后,融合蛋白的表达量最高且稳定表达;在包涵体洗涤的过程中,使用含有φ=1%的Triton X-100、2 mol/L尿素和0.5 mol/L NaCl的缓冲液洗涤包涵体沉淀,其效果最佳,用Western Blotting方法检测出该蛋白能发生抗原抗体反应,并且将重组蛋白免疫7只小鼠后,其中有6只小鼠产生了抗SS抗体,表达产物具有免疫原性.此研究为进一步开发生长抑素基因工程疫苗提供了可靠的实验依据.
2018年02期 v.36;No.139 110-116页 [查看摘要][在线阅读][下载 2169K] [下载次数：137 ] |[引用频次：2 ] - 朱小雨;杨观玉;黎梓燃;汪成洋;谢曦;
为了探讨褐藻素(fucoxanthin,FX)是否对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞的纤维化病变有缓解作用,同时也为了探究其作用机制,本研究通过Western Blot方法,检测了细胞外基质的主要成分—纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和四型胶原(collagen IV,Col IV)的表达;利用免疫荧光方法观察了细胞中FN的含量;采用罗丹明标记鬼笔环肽对细胞骨架进行染色,观察了细胞骨架的变化;使用相关试剂盒检测了细胞内活性氧的变化、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的酶活性以及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量;利用Western blot方法观察了细胞炎症相关因子ICAM-1和TGF-β1的表达.结果表明:在高糖刺激下的肾小球系膜细胞中蛋白FN和Col IV的含量显著升高,细胞呈现肥大状态;FX的处理在一定程度上可缓解上述病理现象,FX处理后高糖诱导升高的活性氧和MDA含量显著降低,而高糖诱导的下调的SOD活性被显著升高;高糖下显著升高的炎症因子—细胞间黏附分子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的蛋白水平同样被FX逆转.由此认为:FX可以减少高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞的细胞外基质成分的积累,而且可以缓解细胞肥大现象,其机制可能与细胞内氧化应激减轻和炎症因子表达减少有关.研究提示:褐藻素对糖尿病肾病具有一定的保护效应.
2018年02期 v.36;No.139 117-123页 [查看摘要][在线阅读][下载 1880K] [下载次数：259 ] |[引用频次：4 ] - 黄艺;付双玉;朱晓鹏;长孙东亭;罗素兰;
为了从海南产桶形芋螺(Conus betulins Linnaeus)的毒液中发现作用于烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)不同亚型的天然毒素,本研究利用高效液相色谱法,从桶形芋螺的毒液中分离和纯化了天然毒素组分,并以非洲爪蟾卵母细胞表达的nAChRs各种亚型为药靶,采用双电极电压钳电生理技术,筛选了作用于nAChRs不同亚型的天然芋螺毒素组分.结果显示:通过分离和纯化方法,从桶形芋螺的毒液中获得了16个天然毒素组分,此后测定了每个组分对nAChRs各个亚型的阻断活性,同时发现组分CBL-2,CBL-3和CBL-4对肌肉型(α1β1δε)nAChR具有强阻断活性;组分CBL-12对α4β2 nAChR亚型有阻断作用;组分CBL-4和CBL-5对α3β2 nAChR亚型有阻断作用.由此认为:这5个天然毒素组分分别对α3β2,α4β2和α1β1δεnAChR这三种亚型有阻断活性,特别是其能阻断α4β2 nAChR亚型的活性,在此之前还未发现α4β2 nAChR亚型的特异阻断剂.
2018年02期 v.36;No.139 124-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1749K] [下载次数：196 ] |[引用频次：2 ] - 李静;左裕;陈瑞州;兰子汉;林电;
试验以极品早冠F1辣椒为研究对象,通过2016年11月~2017年5月大田试验,选择辣椒生长旺盛期时段,研究了辣椒叶、茎、果、根器官干物质及养分积累与分配特性,以及探讨了4个器官营养元素分配相关性特点,以了解辣椒生长旺盛时期各器官积累与分配特点,为辣椒优质高产制定合理的施肥方案.结果表明:在9个处理中,N0K2(N:0水平,K:2水平;下同)处理在生长旺盛时期整株干物质积累量最高为54.25g·株~(-1),较最低干物质积累量高28.89%,与其他几个处理差异性显著.氮、磷、钾养分积累量最高均为N0K2处理,分别为1.85 g·株~(-1)、0.18 g·株~(-1)、2.30 g·株~(-1),较最低分别高33.51%、44.44%、43.47%.在叶、茎、根、果4个器官的干物质与氮、磷、钾积累量分配比例上,叶器官分配比例超过50%,其分配比例大小表现为叶>果、茎>根.各器官养分分配中,叶器官与茎、果、根器官均为正相关,在氮素养分分配上,叶与茎、果、根的相关系数分别为0.498、0.438、0.592,磷素分配上,叶与茎、果、根的相关系数分别为0.651、0.429、0.622,钾素分配上,叶与茎、果、根的相关系数分别为0.662、0.403、0.486.因此,在生长旺盛期,叶器官的干物质和养分积累量最高,在作物生长前期应保证各营养器官的正常生长,有利于后期辣椒优质高产.
2018年02期 v.36;No.139 133-138页 [查看摘要][在线阅读][下载 137K] [下载次数：100 ] |[引用频次：1 ] - 黄向党;许彩娟;李大周;徐峰;
研究了不同产地的降香黄檀和越南黄檀,并进行木射线比较解剖,最后结果表明:降香黄檀与越南黄檀木射线比率、射线宽度尺寸、射线高度尺寸各项指标存在显著性差异;经方差分析,差异性均达到极显著水平;射线宽度和高度细胞数各项指标均不存在显著性差异.
2018年02期 v.36;No.139 139-145页 [查看摘要][在线阅读][下载 3833K] [下载次数：418 ] |[引用频次：8 ] - 刘洪涛;杨明秋;何玉贵;唐贤明;
选用15对多态性较高的微卫星引物,对8个地理群体的凡纳滨对虾的遗传多样性和亲缘关系进行了分析,结果显示:8个群体的平均有效等位基因数(Ne)为2.26~2.86;平均观测杂合度(Ho)为0.59~0.71;平均多态信息含量(Pic)为0.42~0.55.厄瓜多尔、新加坡、海南和泰国正大一群体的遗传变异度大,为高多态性群体.新加坡群体和海南本地群体的遗传距离最大(0.2154),海南本地群体和泰国正大一群体的遗传距离最小(0.0214),即海南本地群体与泰国正大一群体的亲缘关系最近,与新加坡群体的亲缘关系最远.
2018年02期 v.36;No.139 146-152页 [查看摘要][在线阅读][下载 254K] [下载次数：188 ] |[引用频次：12 ] - 许悦;王印庚;周永灿;张正;廖梅杰;李彬;梁友;
2016年,针对海南岛沿岸9个石斑鱼养殖场的石斑鱼皮肤溃疡病的调查发现,该疾病的发病面积广、死亡率高,对养殖产业的危害严重.从9个采样点3种患病石斑鱼样品的组织中分离得到了9株优势菌株,人工回感试验表明,其感染特征与自然病症一致,证明这9株菌均为皮肤溃疡病的致病原,在经过生理生化和16S r DNA序列分析后,这9株菌均被鉴定为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi).人工回感试验证实,菌株SY-1对珍珠龙胆石斑鱼的毒力最强,其14天每克鱼体重的半致死剂量(LD50值)为7.18×10~4cfu;药敏实验的分析表明,这9株病原菌对34种抗菌药物的药敏谱基本一致,但对氟苯尼考、强力霉素、四环素等药物高度敏感;病理学的研究表明,患病鱼的鳃丝、皮肤、肌肉、肝脏、脾脏、肾脏、肠道和脑等组织器官都发生了不同程度的病理变化,因此认为该病为全身性感染.本研究表明,目前海南地区养殖石斑鱼皮肤溃疡病的致病原有较高的病原同一性,主要为哈维氏弧菌;而较早报道的溶藻弧菌、副溶血弧菌等致病菌的优势度大大降低了,其致病力有所下降,并且与海南地区养殖石斑鱼皮肤溃疡病的相关度不大.
2018年02期 v.36;No.139 153-163页 [查看摘要][在线阅读][下载 3135K] [下载次数：795 ] |[引用频次：18 ] - 郭伟良;吴梦晓;胡文婷;王世锋;孙云;周永灿;
为研究温度对罗非鱼无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)抗菌药物敏感性的影响,以无乳链球菌CICC10465及4株从海南分离的罗非鱼无乳链球菌作为供试菌,采用显微计数法测定了供试菌在25,30和37℃下培养18 h后的菌体浓度,并采用NCCLS药敏纸片法测定了21种抗菌药物在此3个温度下对供试菌抑菌圈直径的影响,并对各条件下的抑菌圈直径进行了差异性分析.结果表明,除了PBSA1502之外的4株供试菌,其生长均受温度显著影响,在任一测试温度下各供试菌对青霉素类抗菌药物均敏感,对碳青霉素类和大环内酯类抗菌药物亦敏感或中介;16种抗菌药物对3株以上供试菌的抑菌圈直径受温度显著影响;不同抗菌药物对不同供试菌株的抑菌圈直径受温度的影响趋势和程度不同.
2018年02期 v.36;No.139 164-172页 [查看摘要][在线阅读][下载 394K] [下载次数：175 ] |[引用频次：2 ] - 李东丽;傅国华;薛杨;杨众养;
为了解热带滨海砂地生态系统碳通量特征及其成因,本研究以海南省文昌地区典型砂地植被为例,采用涡度相关技术进行长期的碳通量观测,同期开展了温度、降雨、辐射等气象因子监测.结果表明:1)典型热带滨海砂地植被碳汇/效益显著,2016年碳收支量为-400.959 g·m~(-2)·y~(-1);2)典型热带滨海砂地植被生态系统碳交换的季节变化明显,雨季(5~10月)碳通量变化差异较大,雨季前期(5~7月)净CO2交换(NEE,Net Ecosystem Exchange)占全年碳交换量的58%,而雨季后期(8~10月)受降雨等因素影响,NEE仅占全年碳交换量的10.7%;3)典型热带滨海砂地植被生态系统碳交换有明显的日变化格局,净生态系统碳交换最大值出现在正午12:00~2:00之间.日最大交换量出现在4月,最大值为-0.655 mg·m~(-2)·s~(-1);4)雨季生态系统碳交换量对于气象因子的响应显著于旱季,光合有效辐射是影响生态系统碳通量的主要影响因子,其雨季相关性R~2为0.70.
2018年02期 v.36;No.139 173-182页 [查看摘要][在线阅读][下载 2993K] [下载次数：269 ] |[引用频次：5 ] - 张聪;曹宝珠;宋文涛;苏正;
提出了一种新型建筑隔墙结构-复合双面钢丝网架膨胀珍珠岩EPS板,首先利用对比试验确定了膨胀珍珠岩水泥砂浆的配合比,并制作了EPS板,并对其进行了极限抗弯承载力试验,最后分析了几种因素对膨胀珍珠岩水泥砂浆强度和EPS试样板质量的影响.结果表明:随着水泥用量的增多,膨胀珍珠岩水泥砂浆的强度和EPS试样板的质量也增大;但在水泥与膨胀珍珠岩的质量比不变的情况下增加水的含量,自然养护试块的强度要高于标准养护的强度;EPS板的力学性能、物理性能较好,适合作为装配式隔墙进行推广.
2018年02期 v.36;No.139 183-189页 [查看摘要][在线阅读][下载 3784K] [下载次数：146 ] |[引用频次：2 ] - 符羽佳;邱宙廷;丁庆磊;张仰福;李光范;李江;施杰;
为了探究桩侧表面粗糙度对桩承载力的影响,对砂中模型桩进行了抗压静载试验.试验在桩侧表面附加径向齿长为2 mm的桩齿,依次成倍地缩小桩齿间距,改变桩侧表面桩齿的层数,分析齿桩的抗压承载特性。试验结果表明:相比于光面桩,齿桩的沉降位移较小,说明齿桩的承载力比光面桩高;在加载阶段,随着桩齿间距成倍的缩小,桩齿层数的增加,桩侧摩阻力逐渐增大,齿桩的沉降位移依次减小,其承载力逐渐提高,并且在一定的弹性承载阶段,齿桩的桩侧摩阻力和承载力基本上呈线性关系增大;在卸载阶段,齿桩的回弹值较高,说明齿桩的承载恢复能力较好.
2018年02期 v.36;No.139 190-196页 [查看摘要][在线阅读][下载 2326K] [下载次数：95 ] |[引用频次：2 ] - 刘国漪;张少波;周劲松;
针对某一膜式空气弹簧,运用非线性有限元软件ABAQUS建立有限元模型.首先通过模拟空气弹簧静特性试验,得出了空气弹簧在给定位移和一定初始气压情况下的静刚度特性曲线,其次改变空气弹簧的物理参数,分析初始气压、帘线加强层的角度和各层间的距离对空气弹簧垂向静特性的影响,最后建立动刚度模型,研究在特定工作气压下振动频率对动刚度的影响.计算结果表明,该膜式空气弹簧的帘线层角度、帘线层间距的改变对其静刚度会产生相应的影响;不同频率下,空气弹簧的动刚度也将发生相应改变以适应不同工况.
2018年02期 v.36;No.139 197-202页 [查看摘要][在线阅读][下载 1632K] [下载次数：522 ] |[引用频次：17 ] 下载本期数据